Page 14 - AMC Boletín #55

Edición genética con la técnica CRISPR/Cas9

Técnica que facilita
el estudio del
sistema inmune

Paula Licona Limón, Todos los organismos, entre ellos bacterias, ratones y
investigadora del Instituto seres humanos, están expuestos a agentes externos que
de Fisiología Celular de la pueden ser nocivos, por ello han desarrollado mecanis-
UNAM. Foto: Elizabeth Ruiz/ mos moleculares de defensa que les permiten combatir-
AMC. los; entender cuáles son las bases moleculares respon-
sables de la protección, por ejemplo, ante una infección
por gusanos, puede contribuir al desarrollo de marcado-
res de diagnóstico temprano y de inmunoterapias que
ayuden a potenciar la respuesta del hospedero contra infecciones.
Para estudiar la respuesta inmune, la doctora Paula Licona Limón, del Instituto de
Fisiología Celular de la UNAM, se enfoca en las vías de señalización de dos moléculas,
una es el factor de crecimiento transformante beta, relacionado con el sistema inmune,
y la interleucina 9, una citoquina producida por los linfocitos-T. Con el fin de conocer
su papel en la función o diferenciación de estas células utilizó la técnica CRISPR/Cas9
de edición del genoma, con la que generó ratones deficientes de moléculas relaciona-
das con ambas vías en un tiempo menor al que requieren otras técnicas.
Durante su estancia posdoctoral en la Universidad de Yale, en el laboratorio del
doctor Richard Flavell, la investigadora participó en un estudio en el que se identificó
una población de linfocitos que expresan interleucina 9 y que son importantes en la
protección contra los gusanos. Una vez que Licona y los investigadores con quienes
trabajó ubicaron genes candidatos, que por su nivel de expresión podían ser relevantes
para la función de dichos linfocitos, generaron ratones deficientes de esas moléculas.
“Antes de regresar a México logré hacer ratones con pérdida de un fragmento del
ácido desoxirribonucleico (ADN) en los genes candidatos de la población de linfocitos
que seleccionamos, generé dos tipos de ratones deficientes con el sistema clásico de
CRISPR que utiliza la endonuclesa Cas9 silvestre, y también con un sistema modificado
que usa una endonucleasa mutante llamada nickasa que disminuye la posibilidad de
cortar regiones del ADN fuera del blanco”, dijo Licona en entrevista para la AMC.

De la bacteria a los ratones

CRISPR fue descrito en 1987, cuando al estudiar algunos genes bacterianos se encon-
traron regiones del cromosoma de las bacterias que iban añadiendo secuencias nuevas.
Fue hasta el 2007 que los investigadores entendieron que se trataba del sistema inmu-
ne de la bacteria, “es como su carta de vacunación, cada pedazo de ADN en esa región
del genoma es de los virus o fagos que la han infectado”.

Cuando la bacteria es invadida por un virus, algunas de sus enzimas Cas capturan par-
te del ADN del invasor, lo cortan en fragmentos y los incorporan, separados cada uno
por una secuencia repetida en la posición fija del cromosoma o locus con CRISPR, para

14 / Boletín informativo de la Academia Mexicana de Ciencias